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    胚胎胰腺組織來(lái)源細胞;CCC-HPE-2?培養操作步驟
    點(diǎn)擊次數:187 更新時(shí)間:2024-05-30

    胚胎胰腺組織來(lái)源細胞;CCC-HPE-2培養操作步驟 :

    1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

    2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 

    3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 

    4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 

    5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 

    實(shí)驗要點(diǎn)及說(shuō)明:

    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 

    2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 

    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 

    4.如果需要更多生長(cháng)狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過(guò)大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 

    5.如果細胞貼壁生長(cháng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。


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